Флуоресцентная микроскопия (LSFM) появилась как преобразующий метод визуализации в исследовании доставки лекарств и эмбрионального развития, предлагая визуализацию в реальном времени с высоким разрешением и минимальной фототоксичностью. В этом обзоре рассматривается применение LSFM для отслеживания фармакокинетики лекарств, тканеспецифического нацеливания и эффективности лекарств на критических фазах эмбрионального развития. Недавние достижения в области флуоресцентной маркировки и интеграции машинного обучения позволили более точно контролировать высвобождение, распределение и взаимодействие лекарств с развивающимися тканями. Способность LSFM фиксировать долгосрочную динамику с разрешением на уровне одной клетки произвела революцию в открытии лекарств, особенно в наномедицине и таргетной терапии. Интегрируя LSFM с мультимодальной визуализацией и анализом данных на основе ИИ, исследователи теперь лучше подготовлены к исследованию сложных биологических процессов и оптимизации доставки лекарств высококонтролируемым, минимально инвазивным способом. Наконец, в обзоре подчеркивается ключевая роль LSFM в продвижении исследований доставки лекарств, решении существующих проблем и открытии новых горизонтов в клинических приложениях.